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PS Focurose HPL

價(jià) 格：詢(xún)價(jià)

規(guī) 格：25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地：中國(guó)

貨號(hào)：HQ220325001L

品牌：匯研生物

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產(chǎn)品概述

為確保產(chǎn)品的性能和無(wú)憂的操作，使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本手冊(cè)，有任何疑問(wèn)請(qǐng)咨詢(xún)本公司售后技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N(xiāo)售人員（聯(lián)系方式見(jiàn)附錄）。

1.產(chǎn)品介紹

PS Focurose HPL是一種特定的親和填料，適用于部分病毒、病毒樣顆粒以及某些特定的抗原和蛋白（見(jiàn)表2）的分離純化。

特點(diǎn)：

a.快速、簡(jiǎn)單（一步純化）。

b.載量高。

c.易于放大。

表1：性能參數(shù)

介質(zhì)	PS Focurose HPL
基質(zhì)	高剛性瓊脂糖
粒徑范圍	45-165μm
平均粒徑	90±5μm
溶菌酶載量	≥3mg/ml介質(zhì)
pH穩(wěn)定性	5-12（長(zhǎng)期） 5-12（短期）
操作壓力	≤0.3MPa
流速	≧300cm/h
貯存溶液	20%乙醇
貯存溫度	4-30℃

表2：PS Focurose HPL適用性

Viruses

Viral/Microbial Agents

Rabies

Influenza

Japanese Enchephalitis

Feline Leukemia

Feline Herpes

Feline Calicivirus

Respiratory Syncytial Virus

Human Herpes Simplex

Human Measles

Human Parainfluenza

Herpes Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits

Hepatitis B Surface Antigen

Filamentous Hemagglutinin from B. pertussis

Leucocytosis Promoting Factor Hemagglutinin

2.溶液配制

平衡液：0.01M PB，調(diào)節(jié)pH 7.2，4-8℃保存。

洗脫液：0.01M PB、1.0M NaCl，調(diào)節(jié)pH 7.2，室溫保存。

備注：平衡液pH為7.2±0.2，在平衡液中可經(jīng)添加0.1M NaCl抑制少量雜質(zhì)的吸附,取決樣品特性；洗脫時(shí)可以把NaCl可增加到2M來(lái)提高洗脫能力。

3.樣品的制備

a.樣品所在溶液鹽的組分及pH必須和平衡液保持一致，可以通過(guò)用平衡液稀釋或透析、超濾、G25進(jìn)行緩沖液置換處理。

b.樣品過(guò)濾（粒徑≤45μm用0.22μm過(guò)濾、粒徑≤165μm用0.45μm過(guò)濾、粒徑≤300μm用0.8μm過(guò)濾，避免堵塞離子交換介質(zhì)）。

備注：不建議直接用強(qiáng)酸或強(qiáng)堿調(diào)整樣品溶液的pH，可能會(huì)出現(xiàn)目標(biāo)物的降解和失活。

4.純化流程（以XK16/10為例）

4.1用純化水以5ml/min沖洗5CV。

4.2用平衡液以5ml/min沖洗10CV。

4.3將樣品以2.5ml/min上樣，上樣完成后用平衡液進(jìn)行清洗直至基線平穩(wěn)。

4.4用洗脫液以5ml/min洗脫10CV，并收集洗脫液。

4.5用純化水以5ml/min沖洗5CV。

4.6用保存液以5ml/min沖洗后保存。

5.清洗（以XK16/10為例）

清洗后可以去除一些強(qiáng)結(jié)合性物質(zhì)（例如一些強(qiáng)結(jié)合的蛋白、變性蛋白、脂類(lèi)等），從而達(dá)到恢復(fù)介質(zhì)的優(yōu)良性能（例如載量、流動(dòng)性、柱效等）。

建議每使用5-10次后進(jìn)行一次清洗，具體清洗頻率需根據(jù)純化的初始樣品的潔凈度進(jìn)行調(diào)整。

5.1用3M NaCl以1ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

5.2用0.1M NaOH以1ml/min的流速?zèng)_洗20CV。

5.3用3M NaCl以1ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

5.4用純化水以5ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

5.5用保存液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

6.常見(jiàn)問(wèn)題

表3：常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

問(wèn)題	可能原因	解決方案
純化時(shí)目標(biāo)物不與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較低	1.上樣量過(guò)載	降低上樣量
	2.上樣流速過(guò)快	降低上樣流速
	3.蛋白或脂類(lèi)在介質(zhì)中聚集	及時(shí)有效地清洗介質(zhì)或更換新的介質(zhì)
	4.目標(biāo)物不帶電或與介質(zhì)帶同樣的電荷	篩選合適的結(jié)合緩沖液
	5.樣本或平衡液中鹽濃度和pH不正確	檢查樣品和平衡液中的電導(dǎo)和pH
	6.選用了錯(cuò)誤的緩沖液	參考緩沖液選擇表
	7.樣品中加入了不合適的去污劑	檢查樣品中是否有不合適的去污劑
洗脫時(shí)沒(méi)有收集到目標(biāo)物或只收集到少量目標(biāo)物	1.目標(biāo)物沒(méi)有與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較少	先確認(rèn)目標(biāo)物是否與介質(zhì)結(jié)合
	2.洗脫條件不合適	洗脫液洗脫能力不夠，加大鹽濃度和調(diào)整洗脫液pH
	3.洗脫時(shí)間不夠	降低流速，延長(zhǎng)洗脫液的保留時(shí)間
	4.洗脫體積過(guò)小	加大洗脫體積
	5.目標(biāo)物在洗脫液條件下出現(xiàn)聚集沉淀	檢測(cè)目標(biāo)物在洗脫液條件（鹽濃度和pH）下的溶解度和穩(wěn)定性。
目標(biāo)物純度較低	1.樣品沒(méi)有經(jīng)過(guò)前處理	樣品上柱前必須要經(jīng)過(guò)離心或過(guò)濾
	2.樣品粘度過(guò)高	用平衡液適當(dāng)?shù)南♂寴悠?，降低粘度?/span>
	3.洗雜不徹底	加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致
	4.雜質(zhì)蛋白或脂類(lèi)在介質(zhì)中聚集沉淀	及時(shí)有效地清洗介質(zhì)
	5.洗脫條件不佳	優(yōu)化洗脫條件
	6.目標(biāo)物出現(xiàn)降解	檢測(cè)目標(biāo)物的穩(wěn)定性
	7.柱料裝填效果不佳	重新裝填或購(gòu)買(mǎi)
	8.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積	重新裝柱或降低儲(chǔ)樣體積
	9.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng)	介質(zhì)使用完后，請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì)
介質(zhì)載量下降	1.上樣流速過(guò)快	降低上樣流速
	2.蛋白或脂類(lèi)在介質(zhì)中聚集，導(dǎo)致載量下降。	及時(shí)清洗介質(zhì)
	3.使用次數(shù)過(guò)多，配基被氧化或脫落	及時(shí)清洗介質(zhì)或更換新介質(zhì)
色譜峰上升過(guò)陡	介質(zhì)裝填過(guò)緊	重新裝柱
色譜峰上升過(guò)緩或拖尾	介質(zhì)裝填太松	重新裝柱
柱床有裂縫或干涸	出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入	檢查管路是否有泄露或氣泡，重新裝柱
液流較慢	1.蛋白或脂類(lèi)聚集	及時(shí)清洗介質(zhì)或?yàn)V膜
	2.蛋白沉淀在介質(zhì)中	調(diào)整平衡液和洗脫液組分，以維持目標(biāo)物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結(jié)合效率
	3.分離柱中微生物生長(zhǎng)	所用試劑必須經(jīng)過(guò)過(guò)濾和脫氣；樣品上柱前必須離心或過(guò)濾

7.訂購(gòu)信息

表4：訂購(gòu)信息表

產(chǎn)品	規(guī)格	貨號(hào)
PS Focurose HPL	25ml	HQ220325025M
PS Focurose HPL	100ml	HQ220325100M
PS Focurose HPL	500ml	HQ220325500M
PS Focurose HPL	1L	HQ220325001L
PS Focurose HPL	5L	HQ220325005L
PS Focurose HPL	20L	HQ220325020L