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   為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作，使用前請仔細(xì)閱讀本手冊，有任何疑問請咨詢本公司技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員。

   MMA Focurose HPL是一種多模式生物分離介質(zhì)，主要應(yīng)用于單抗的中度純化和精細(xì)純化（用于去除Protein A純化后樣品中的Protein A*、二聚體、多聚物、宿主細(xì)胞蛋白、核酸），也可以應(yīng)用于其它生物分子的精細(xì)純化（去除二聚體、多聚物、宿主細(xì)胞蛋白、核酸等）。

   *:在Protein A-4HF使用過程中可能脫落的極微量Protein A。

1 產(chǎn)品介紹

圖1：MMA Focurose HPL的配基是一種多模式配基，它與目標(biāo)分子存在許多類型的相互作用，主要是離子作用(強陰離子作用)，其次是氫鍵作用和疏水作用等。

特點：

a.在高電導(dǎo)條件下結(jié)合帶電分子，樣本不再受電導(dǎo)的限制，樣本不需要前處理就可進(jìn)行離子交換。

b.載量高，采用流穿模式時具有更高處理量。

c.和傳統(tǒng)離子交換介質(zhì)相比，具有新的選擇性。

d.大孔徑。

表1：MMA Focurose HPL 性能參數(shù)

2 選擇指導(dǎo)

2.1 離子交換介質(zhì)的選擇

圖2：離子交換介質(zhì)的選擇

說明：

a.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點時，選擇陽離子交換介質(zhì)。

b.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點時，選擇陰離子交換介質(zhì)。

c.所使用溶液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍以內(nèi)。

2.2 緩沖溶液的選擇

表2：推薦緩沖液

說明：

a.選擇的緩沖液和鹽可能會干擾性能。

b.電導(dǎo)調(diào)節(jié)可以通過添加鹽或改變緩沖液的濃度。

c.在溶液配制后，須經(jīng)過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用0.8μm過濾）和脫氣處理（超聲或負(fù)壓）。

3 樣品的制備

樣品所在溶液要和平衡液保持一致，可以用平衡液稀釋或透析/超濾/G25進(jìn)行緩沖液置換。

樣品過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用   0.8μm過濾）。

4 純化流程（以XK16/10為例）

采用液滴對液滴（避免引入氣泡）的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

用平衡液以5ml/min的流速沖洗5CV（CV指柱床體積，下同）。

用洗脫液以5ml/min的流速沖洗5CV。

用平衡液以5ml/min的流速沖洗10CV。

將樣品以5ml/min的流速上樣。

用平衡液以5ml/min的流速沖洗10CV。

用洗脫液以5ml/min洗脫5CV或20CV(根據(jù)前期篩選實驗數(shù)據(jù)，采用階梯式洗脫5CV/線性梯度洗脫20CV)。

用再生液以5ml/min的流速沖洗5CV。

備注：再生液=平衡液+2M NaCl，其它組分不變。

5 放大

保持柱床高度不變

5.2 保持線性流速不變

備注：若實際情況和實驗室數(shù)據(jù)有偏差，可以維持停留時間不變。

6 維護(hù)

6.1平衡

柱子裝填完成后，用平衡液以60cm/h的流速沖洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.2再生

每次分離純化后，用再生液以60cm/h的流速沖洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生沒有清洗干凈的物質(zhì)，例如脂類、沉淀物、變性蛋白。

a.強離子結(jié)合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向沖洗5CV。

b.沉淀物、疏水結(jié)合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

c.脂類、強疏水蛋白。

用1.0M NaOH，30%異丙醇以30cm/h的流速反向沖洗5CV

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

6.5滅菌

將介質(zhì)置換到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中進(jìn)行高壓滅菌。

6.6保存

介質(zhì)在20%乙醇中4-30℃保存。

7 訂購信息

表3：訂購信息表

備注：大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購買，請咨詢本公司當(dāng)?shù)劁N售或售前技術(shù)支持。